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[单选题]
PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核甘酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反响,其特异性决定因素为()。
A.模板
B.引物
C.dNTP
D.镁离子
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A.模板
B.引物
C.dNTP
D.镁离子
A.设计引物时应考虑使3端引物和5端引物具有相似的Tm值
B.每条引物自身不应有稳定的发夹结构
C.上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构
D.引物的5和3端必须和模板严格配对结合
E.引物与非特异扩增区的序列无同源性
A.引物的长度在18bp-25bp
B.引物内部不能存在连续的互补序列,防止产生二聚体和发夹结构
C.引物中G+C的含量占45%-55%
D.引物的3`端可以带有生物素、荧光或酶切位点等作为标记
E.两条引物的Tm值应该尽量相近
A.实时荧光定量PCR
B.酶联免疫吸附试验
C.化学发光法
D.胶体金免疫层析技术
E.以上都是