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[主观题]
简述扩增片段限制长度多态性（PCR－RFLP)三个步骤。
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①PCR扩增。优点：简便快速，高效，数kb单基因克隆。缺点：DNA聚合酶活性和保真性限制。(94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……)
②文库筛选。优点：长片段，无碱基错误，位置序列基因克隆。缺点：繁琐，过程复杂，耗时，昂贵。
③化学合成：简便，准确，已知序列基因克隆，引物合成。缺点：受合成仪性能限制，长度很短。
A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端
B.用两种限制酶切割目的基因露出黏性末端
C.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
