A.多位点VNTR分析
B.限制性内切酶片段长度多态性RFLP
C.多位点序列分型MLST
D.核苷酸多态性SNP
①PCR扩增。优点:简便快速,高效,数kb单基因克隆。缺点:DNA聚合酶活性和保真性限制。(94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……)
②文库筛选。优点:长片段,无碱基错误,位置序列基因克隆。缺点:繁琐,过程复杂,耗时,昂贵。
③化学合成:简便,准确,已知序列基因克隆,引物合成。缺点:受合成仪性能限制,长度很短。
A.PCR扩增后电泳条带亮度极弱(<10ng/ul),则至少应再重复PCR两次,确认操作无误后上报方案设计人员
B.对于长度为4200bp的片段,菌落鉴定时所挑克隆数应该为12个及以上
C.如果一天做了10个克隆项目,其中有1个项目克隆数<10个,则应上报后安排对感受态等原料进行质控检测
D.对于干扰项目,一般挑取的克隆数为4个