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[主观题]
简述扩增片段限制长度多态性(PCR-RFLP)技术优势。
简述扩增片段限制长度多态性(PCR-RFLP)技术优势。
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简述扩增片段限制长度多态性(PCR-RFLP)技术优势。
A.多位点VNTR分析
B.限制性内切酶片段长度多态性RFLP
C.多位点序列分型MLST
D.核苷酸多态性SNP
①PCR扩增。优点:简便快速,高效,数kb单基因克隆。缺点:DNA聚合酶活性和保真性限制。(94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……)
②文库筛选。优点:长片段,无碱基错误,位置序列基因克隆。缺点:繁琐,过程复杂,耗时,昂贵。
③化学合成:简便,准确,已知序列基因克隆,引物合成。缺点:受合成仪性能限制,长度很短。
A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端
B.用两种限制酶切割目的基因露出黏性末端
C.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增